BRASÍLICA

Kit para extração de DNA genômico

Código: 13-BR200 – Kit para 50 amostras

Instruções de Uso

 

Descrição:

Metodologia simples e rápida de extração e purificação de DNA a partir de amostras biológicas (sangue total, soro, plasma, bactérias e tecidos vegetais).

A metodologia utiliza o Isocianato de Guanidina e ligação covalente do DNA em partículas de sílica.

 

Componentes:

 

– Tubos com tampão de lise e resina brasílica (L1),

1 Frasco contendo 95 mL do tampão de lavagem (L2),

1 Frasco contendo 95 mL do tampão de lavagem(L3),

1 Frasco contendo 95 mL do tampão de lavagem (L4),

4 Tubos contendo o tampão de eluição (E1).

 

Protocolo Básico:

 

1. Homogeneizar o tubo contendo o tampão L1 (vórtex por 10 s);
2. Adicionar 100 L de amostra no tubo com o tampão L1 (vórtex por 10 s);
3. Deixar o tubo em temperatura ambiente por 10 min agitando periodicamente a cada minuto;
4. Agitar novamente no vórtex durante 10 s;
5. Centrifugar a 10.000 g durante 30 s;
6. Descartar o sobrenadante (preferencialmente por sucção, sem remover o precipitado);
7. Lavar o precipitado adicionado 900 L do tampão L2, dissolvendo o pellet através de repetidas pipetagens, e centrifugar a 10.000 g durante 30 s;
8. Descartar o sobrenadante, sem remover o precipitado;
9. Lavar novamente o precipitado adicionando 900 L do tampão L2, dissolvendo o pellet através de repetidas pipetagens e centrifugar a 10.000 g durante 30 s;
10. Descartar o sobrenadante, sem remover o precipitado;
11. Lavar o precipitado adicionando 900 L do tampão L3, dissolvendo o pellet através de repetidas pipetagens e centrifugar a 10.000 g durante 30 s;
12. Descartar o sobrenadante, sem remover o precipitado;
13. Lavar novamente o precipitado adicionando 900 L do tampão L3, dissolvendo o pellet através de repetidas pipetagens e centrifugar a 10.000 g durante 30 s;
14. Lavar o precipitado adicionando 900 L do tampão L4, dissolvendo o pellet através de repetidas pipetagens e centrifugar a 10.000 g durante 30 s;
15. Descartar o sobrenadante, sem remover o precipitado;
16. Lavar novamente o precipitado adicionando 900 L do tampão L4, dissolvendo o pellet através de repetidas pipetagens e centrifugar a 10.000 g durante 30 s;
17. Deixar secar o pellet a 56°C por 10 min com a tampa do tubo aberta (estufa ou termobloco),
18. Adicionar 100 L do tampão de eluição (E1) ao precipitado;
19. Com leves movimentos descolar o precipitado do fundo do tubo e deixar por mais 10 min a 56°C, desta vez com a tampa do tubo fechada;
20. Centrifugar por 10 min a 12.000 g;
21. Retirar o sobrenadante e transferir para novo tubo, pois aqui estarão os ácidos nucléicos
    extraídos;
22. Utilizar o material obtido em procedimentos de biologia molecular, como amplificação por PCR;
23. Verificar a presença dos ácidos nucléicos através de eletroforese em géis de agarose corados com brometo de etídeo ou blue Green loading dye, analisando sob luz ultravioleta ou quantificar em espectrofotômetro;
24. Para eliminar algum resto de resina nesta etapa, centrifugar novamente a 12.000 g durante
    30s.

 

Armazenamento:

Temperatura ambiente.

 

Garantia da Qualidade

Garantia do produto Brasílica por ela fornecida contra defeitos de produção pelo período de validade do produto, salvo especificações em contrário a constar da proposta.

A garantia abrange defeitos de produção.

 

Exceções na garantia:

Todos os produtos com defeitos oriundos de mau uso, imperícia, conservação ou armazenagem inadequada.

Quando não for utilizado de acordo com sua finalidade de aplicação.