HEPES (Grau Biologia Celular)
Código: BR30337-01:100 g
1. Descrição
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Peso Molecular: 238,31 g/mol
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Fórmula Química: C8H18N2O4S
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Pureza: 99,0%
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Grau: Biologia Molecular
HEPES (4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid) é uma substância química amplamente utilizada como agente tamponante (buffer) em culturas celulares, devido à sua capacidade de manter o pH fisiológico em condições in vitro. Sua principal aplicação está na proteção contra mudanças no pH de soluções e enzimas causadas por processos de congelamento.
É um tampão altamente eficaz, sendo particularmente importante em experimentos que envolvem cultivo celular a 37°C. O HEPES é superior ao NaHCO3 no controle de pH em cultivos de órgãos e outras aplicações biológicas.
Propriedades Físico-Químicas:
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Aparência: Pó branco
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Odor: Sem odor definido
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Solubilidade: 40 g em 100 g de água
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Ponto de Fusão: 23°C – 238°C
Sinônimos:
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4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid
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“Good” buffer
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HEPES, Free Acid
Nota Importante:
A exposição do HEPES à luz pode induzir níveis de foto toxicidade, por isso é essencial mantê-lo protegido da luminosidade para garantir sua eficácia.
2. Aplicação
HEPES é amplamente utilizado em pesquisas biológicas devido à sua capacidade de tamponar soluções dentro de uma faixa de pH de 6,8 a 8,2. Como uma molécula zwitteriônica, sua ação tamponante é ideal para uma ampla gama de aplicações em cultura celular, sendo eficaz entre 10 – 25 mM. Sua maior capacidade de tamponamento proporciona estabilidade nos cultivos celulares, mesmo quando mantidos a 37°C.
Instruções de Uso:
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Após adicionar o HEPES à solução, é recomendado ajustar o pH com NaOH ou HCl, conforme necessário.
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O HEPES é particularmente eficaz para cultivos celulares, pois proporciona um controle mais robusto de pH em comparação ao NaHCO3, especialmente em cultivos de órgãos.
Precauções:
É importante observar que resíduos de HEPES podem interferir nos ensaios de detecção proteica pelo método de Folin, podendo alterar os resultados. Contudo, no método de Biuret, os resultados são mais confiáveis.
Preparação do Tampão HEPES:
O tampão pode ser preparado dissolvendo o HEPES em água e ajustando o pH com NaOH ou KOH até o valor desejado. Para garantir a qualidade da solução, recomenda-se a filtragem com um filtro de 0,1 micra. Isso assegura que o tampão tenha a melhor performance possível.
3. Armazenamento
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Temperatura recomendada: Entre 10°C – 30°C
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Armazenamento: Manter protegido da luz para evitar degradação fotoquímica.
Observações Finais:
HEPES é um reagente essencial em várias aplicações científicas, especialmente no campo da biologia celular e molecular. Seu uso adequado e armazenamento correto garantem resultados confiáveis em suas pesquisas.