[Kit para extração e purificação de RNA com colunas de sílica] – 250 extrações – RUO [13-BR850-25]

Reagentes para Extração e Purificação de RNA

Código: 13-BR850-25
Apresentação: 250 extrações

Instruções de Uso

1. Uso Pretendido

Os reagentes utilizam colunas de sílica (cartuchos/filtro) para extração e purificação de RNA. Recomendados para amostras de:

• Sangue total
• Plasma
• Soro
• Urina
• Culturas de células
• Amostras coletadas via swab nasofaríngeo

2. Características do Produto

• Sistema genérico baseado em colunas de sílica de alta capacidade.
• Compatível com diagnóstico in vitro (qPCR, RT-qPCR).
• Inclui Proteinase K para lise de proteínas e Carreador de RNA para otimização.

Composição do Produto (50 extrações):

Componente	Volume	Quantidade
Hemalise-RBC 10X	9,0 mL	1
Carreador de RNA liofilizado	–	1
Proteinase K (PK) liofilizada	–	1
Diluente PA/PK	1,0 mL	1
Tampão de Lise	20,0 mL	1
Tampão de Lavagem A	16,5 mL	1 (concentrado)
Tampão de Lavagem B	9,0 mL	1 (concentrado)
Tampão de Eluição	2,5 mL	1
Colunas de Sílica	–	50 unidades
Tubos Coletores	–	50 unidades

Especificações:

• Alta eficiência com amostras respiratórias, sangue, e meios de transporte.
• RNA purificado adequado para aplicações moleculares.

Equipamentos Necessários (não fornecidos):

• Centrífuga (20.000 x g ou 14.000 rpm)
• Micropipetas (1-1000 µL) e ponteiras descartáveis com filtro
• Vórtex
• Bloco de aquecimento (56°C), banho-maria ou estufa
• Etanol absoluto (95-100%)
• Tubos tipo Falcon e microtubos

---

3. Preparo dos Reagentes

Proteinase K: Diluir com 500 µL do Diluente PA/PK. Armazenar a -20°C após reconstituição. Usar 10 µL por extração.
Carreador de RNA: Diluir com 250 µL do Diluente PA/PK. Usar 5 µL por extração.
Hemalise 1X: Diluir 1 parte de Hemalise-RBC 10X em 9 partes de água ultrapura.

Tampões de Lavagem: Adicionar etanol absoluto antes do uso:

Componente	Etanol a adicionar	Volume Final
Tampão de Lavagem A	13,5 mL	30,0 mL
Tampão de Lavagem B	21,0 mL	30,0 mL

---

4. Armazenamento e Transporte

• Temperatura ambiente (10-30°C).
• Estáveis até a data de validade na embalagem.
• Para precipitados nos tampões, aquecer a 55-65°C até dissolução completa.

Validade: 12 meses.

---

5. Segurança

• Uso exclusivo por profissionais treinados.
• Equipamentos de proteção individual são obrigatórios.
• Ambiente de laboratório controlado.
• Não usar componentes danificados ou vencidos.
• Trabalhar em fluxo laminar para evitar contaminações cruzadas.

---

6. Procedimento Geral

1. Preparo da Amostra:
   • Sangue total: 200 µL + 1,8 mL de Hemalise 1X.
   • Urina: Centrifugar 2 mL e usar o pellet.
2. Extração e Purificação:
   • Adicionar tampão de lise, Proteinase K e carreador.
   • Incubar, centrifugar, e aplicar nas colunas de sílica conforme protocolo detalhado.