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MEIO_RPMI_Penicilina_Estreptomicina_e_B-Mercaptoetanol – BR30260-05

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RPMI-1640 com HEPES [25 mM], penicilina_estreptomicina e B-mercaptoetanol [50µM] – 500mL

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RPMI 1640 HEPES Penicilina Estreptomicina e B-Mercaptoetanol
Código N°: BR30260-05
500 mL

Armazenamento: 2 a 8ºC

DESCRIÇÃO:
O meio RPMI-1640 foi desenvolvido por Moore e cols. (1969) no Roswell Park Memorial Institute. A sua formulação é baseada no meio RPMI-1630, e utiliza um sistema de tamponamento com bicarbonato e concentrações modificadas de aminoácidos essenciais e vitaminas para estimular o crescimento celular. O meio RPMI-1640 tem sido utilizado na cultura de células humanas normais bem como de células neoplásicas (provenientes de tecidos tumorais).
Quando devidamente suplementado, o meio demonstra enorme aplicabilidade, pois suporta o crescimento de diversos tipos de cultivos celulares, incluindo linfócitos humanos frescos, para ensaios de estimulação em 72 horas com fitohemaglutinina (PHA).
Para evitar o estresse oxidativo, a maioria das células cultivadas utiliza um sistema de defesa antioxidante no entanto; certos tipos de células são incapazes de fazer isto apenas com sua maquinaria genética e, assim, a adição de beta-mercaptoetanol auxilia na manutenção de um ambiente redutor. Por exemplo, as linhas celulares de insulinoma requerem beta-mercaptoetanol para seu crescimento uma vez que a glutationa é altamente oxidada.

ATIVIDADE:
Solução que contem nutrientes para cultivos celulares.

APLICAÇÕES:
– Cultura de células humanas e de outros animais.
– Cultura de células pancreâticas
– Por carecer de timidina na sua composição é muito utilizado para obtenção de sincronização na divisão celular.

CARACTERÍSTICAS:

  • Solução cristalina na concentração de uso (1X)
  • pH a 25oC (com NaHCO3): 7,2 +/- 0,2
  • Osmolaridade (com NaHCO3): 295 +/- 5%.

Obs: Se as condições de armazenamento não forem  mantidas podem ocorrer alterações do tipo:

  • Mudança de cor;
  • Granulações;
  • Insolubilidade;
  • Alteração de pH;
  • Incapacidade de manter a integridade celular sob condições normais.
Composição do meio RPMI-1640-antibióticos/b-mercaptoetanol

Sais inorgânicos mg/L
Ca(NO3)2·4H2O 100
KCl 400
MgSO4 (anidro) 48,84
NaCl 6000
NaH2PO4 (anidro) 800
NaH2PO4 H2O 0
Succinato de Sódio 6H2O 0
Acido Succínico 0
Aminoácidos mg/mL
L-Arginina HCl 200
L-Asparagina 50
L-Ácido Aspártico 20
L-Cistina 2HCl 65,15
L-Ácido Glutâmico 20
L-Glutamina 300
Glicina 10
L-Histidina FB 15
L-Histidina HCl H2O 0
L-Hidroxiprolina 20
L-Isoleucina 50
L-Leucina 50
L-Lisina HCl 40
L-Metionina 15
L-Fenilalanina 15
L-Prolina 20
L-Serina 30
L-Treonina 20
L-Triptofano 5
L-Tirosina 2Na·2H2O 28,83
L-Valina 20
Vitaminas mg/mL
d-Biotina 0,2
D-Ca Pantotenato 0,25
Bitartrato de Colina 0
Cloreto de Colina 3
Acido Fôlico 1
Mio-Inositol 35
Niacinamida 1
Piridoxina HCl 1
Riboflavina 0,2
Tiamina HCl 1
Vitamina B-12 0,005
Outros componentes mg/mL
D-Glicose 2.000
Acido Para-Aminobenzoic (PABA) 1
Glutationa (Reducida) 1
Vermelho de fenol 0,0053
HEPES 0,00595
NaHCO3 2.000
Penicilina/Estreptomicina (10.000)
b-mercaptoetanol 50mM

 

Referências:
Moore GE, Murphy GP, Papermaster BW, Amiraian K, Kenny GM, Moore RH. Purified

Roswell Park cultured antilymphocytic globulin RPMI-CALG: preparation and clinical trial. J Surg Oncol. 1969;1(2):153-66.

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