TMB – Solução cromogênica de tetrametilbenzidina

TMB – 3, 3′, 5, 5′-Tetramethylbenzidine One component Microweel Substrate 
Código: 13-2023-02
Apresentação: 200 mL
Temp. de Armazenamento: 2-8°C 

Descrição: 

TMB One Component Microwell Substrate, em pó pode ser utilizado na preparação de soluções pronta-para-uso para ser utilizada em reações de ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay).

O produto final da reação de ELISA se apresenta como uma solução de coloração azulada que pode ser medida em 370 nm ou entre 620-650 nm. Este produto pode ser utilizado para reações de ponto final e reações de cinética de ligação.

A reação enzima-substrato (TMB) pode ser detida utilizando uma solução TMB Stop Solution (ácido sulfúrico 2N) ou alguma outra solução obtida comercialmente. Este produto não é recomendado para aplicações em estudos de membrana imunohistoquímica, pois estes ensaios requerem precipitação específica de produto.

Manuseio e armazenamento: 

Armazenamento recomendado entre 2-8°C. Este produto é altamente estável desde que armazenado nas condições recomendadas. O substrato é sensível à luz e deve ser protegido da luz direta ou fontes de luz indiretas.

Utilização: 

Soluções de TMB devem ser preparadas no momento do uso. A estabilidade por longos períodos de tempo ainda não foi determinada.

Preparar o buffer citrato-fosfato em pH 5,0 na concentração 0,05M.

Remover a quantidade desejada do TMB em pó e dissolver em DMSO qualidade BM para a concentração final de 10 g/mL.

Adicionar 100 L de solução de TMB para cada 100 mL de citrato-fosfato.

Adicionar 2 L de peróxido de hidrogênio (30%) para cada 10 mL de citrato-fosfato.

Misturar até homogeneização e adicionar 100 mL da solução de TMB preparada para cada poço, onde será formada a solução de coloração azul.

Proceder à leitura de acordo com cada protocolo.